<abbr id="wwuem"></abbr><li id="wwuem"><dl id="wwuem"></dl></li>
  • <rt id="wwuem"><tr id="wwuem"></tr></rt>
  • <rt id="wwuem"><delect id="wwuem"></delect></rt>
  • <li id="wwuem"><dl id="wwuem"></dl></li>
    <rt id="wwuem"></rt>
    您好,歡迎進入研域(上海)化學試劑有限公司網(wǎng)站!
    一鍵分享網(wǎng)站到:
    • 資料下載DOWN

      您當前的位置:首頁 > 資料下載 > 雌二醇 ELISA 說明書

      雌二醇 ELISA 說明書

      發(fā)布時間: 2010/3/12  點擊次數(shù): 1569次
      提 供 商: 研域(上海)化學試劑有限公司 資料大小:
      圖片類型: 下載次數(shù): 0
      資料類型: 瀏覽次數(shù): 1569
      相關(guān)產(chǎn)品:
      詳細介紹:

      (Human) 雌二醇 (E2) ELISA 檢測試劑盒

      本試劑僅供研究使用     

       

      試驗原理

      E2試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA.已知E2濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將E2和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物AB,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中E2的濃度呈比例關(guān)系。

       

      試劑盒內(nèi)容及其配制

      試劑盒成份(2-8℃保存)

      96孔配置

      48孔配置

      配制

      96/48人份酶標板

      1塊板(96T

      半塊板(48T

      即用型

      塑料膜板蓋

      1

      半塊

      即用型

      標準品:800pg/ml

      1瓶(0.6ml

      1瓶(0.3ml

      按說明書進行稀稀

      空白對照

      1瓶(1.0ml

      1瓶(0.5ml

      即用型

      標準品稀釋緩沖液

      1瓶(4.0ml

      1瓶(2.0ml

      即用型

      生物素標記的抗E2抗體

      1瓶(6.0ml

      1瓶(3.0ml

      即用型

      親和鏈酶素-HRP

      1瓶(8.0ml

      1瓶(4.0ml

      即用型

      洗滌緩沖液

      1瓶(20ml

      1瓶(10ml

      按說明書進行稀釋

      底物A

      1瓶(6.0ml

      1瓶(3.0ml

      即用型

      底物B

      1瓶(6.0ml

      1瓶(3.0ml

      即用型

      終止液

      1瓶(6.0ml

      1瓶(3.0ml

      即用型

      標本稀釋液

      1瓶(12ml

      1瓶(6.0ml

      即用型

       

      自備材料

      1.  蒸餾水。

      2.  加樣器:5ul10ul50ul100ul200ul500ul1000ul

      3.  振蕩器及磁力攪拌器等。

       

      安全性

      1.  避免直接接觸終止液和底物AB。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。

      2.  實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

      3.  不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

       

      操作注意事項

      1.  試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。

      2.  實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

      3.  不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

      4.  使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物AB液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。

      5.  使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

      6.  洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。

      7.  底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。

      8.  加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

      9.  按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

       

      樣品收集、處理及保存方法

      1、  血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

      2、  血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

      3、  細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

      4、  組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液

      5、  保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

       

      試劑的準備

      1.  標準品:標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:

      800 pg/ml

      6號標準品)

      原倍濃度不用稀釋直接加入50ul

      400 pg/ml

      5號標準品)

      100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液

      200 pg/ml

      4號標準品)

      100ul5號標準品加入100ul的標準品稀釋液

      100 pg/ml

      3號標準品)

      100ul4號標準品加入100ul的標準品稀釋液

      50 pg/ml

      2號標準品)

      100ul3號標準品加入100ul的標準品稀釋液

      25 pg/ml

      1號標準品)

      100ul2號標準品加入100ul的標準品稀釋液

      0 pg/ml

      (空白對照)

      原始濃度不用稀釋直接加入50ul

       

      2.  洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

       

       

      操作步驟

      1.  使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。

      2.  根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液11稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。

      3.  加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。

      4.  甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

      5.  每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。

      6.  甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

      7.  每孔加入底物AB50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。

      8.  取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。

      9.  450nm波長處測定各孔的OD值。

       

      建議使用的實驗方案

       

      標準品濃度(pg/ml

       

      A

      800

      800

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      B

      400

      400

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      C

      200

      200

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      D

      100

      100

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      E

      50

      50

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      F

      25

      25

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      G

      0

      0

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      H

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

      樣品

       

       

      局限

      6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到的結(jié)果。

       

      試劑盒性能

      1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990

      2. 特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。

      3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%

       

      結(jié) 果 判 斷

      1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD

       

      2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的E2標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的E2含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。

       

      3檢測值范圍:0-800pg/ml

       

      4、敏感度: 1.0 pg/ml

       

       

    產(chǎn)品中心 Products
    在線客服 聯(lián)系方式

    服務(wù)熱線

    021-54479081
    021-54461587

    主站蜘蛛池模板: 最近更新的2019免费国语电影| 日韩免费视频一区| 中文字幕一区二区三区日韩精品| 野花社区视频www| 日日碰狠狠添天天爽不卡| 浮力影院国产第一页| 久久国产精品国产精品| 亚洲激情电影在线| 69国产成人精品午夜福中文| 色噜噜成人综合网站| 亚洲三级在线看| 看免费毛片天天看| 国产色丁香久久综合| 女人被男人狂躁视频免费| 精品国产一区二区三区不卡在线| 亚洲国产高清美女在线观看| 女人把私密部位张开让男人桶| 午夜视频在线观看视频| 国产精品自在线观看剧情| 国产你懂的视频| 国产精品99精品久久免费| 在线观看国产福利| jazzjazz国产精品一区二区| 国产高清精品入口91| 毛片网在线观看| 一级毛片在播放免费| 精品国产亚洲一区二区三区| 天天干天天干天天| 揄拍成人国产精品视频| 日本dhxxxxxdh14日本| 亚洲一区二区三区无码国产| 国产成人无码av在线播放不卡| 波多野结衣中文字幕电影播放| 天天躁日日躁狠狠躁| 老子影院午夜精品无码| 亚洲欧洲另类春色校园网站| 在线观看中文字幕码| 天天做天天爱天天爽综合网| 久久人妻少妇嫩草AV| 婷婷激情五月综合| 国产精品久久国产精品99盘|